teknova培養(yǎng)基pH值對細(xì)胞的影響作用
發(fā)布日期:2023-02-07 點擊:1067
teknova培養(yǎng)基是用來供給細(xì)胞營養(yǎng),促使細(xì)胞增殖的,也是細(xì)胞賴以生長的環(huán)境。細(xì)胞培養(yǎng)實驗中用量比較多的就是細(xì)胞培養(yǎng)基,雖然細(xì)胞培養(yǎng)試驗基本技術(shù)大同小異,但是每種細(xì)胞的培養(yǎng)條件卻相差甚遠(yuǎn)。若偏離某種細(xì)胞所需的培養(yǎng)條件,則會導(dǎo)致細(xì)胞表達(dá)不同的表型。
常見的培養(yǎng)基添加因子
1、青霉素-鏈霉素(雙抗生素):用于預(yù)防細(xì)胞污染
2、胰島素:作為細(xì)胞培養(yǎng)的添加劑,可促進(jìn)細(xì)胞增殖、延長細(xì)胞壽命,增加蛋白和核酸的表達(dá)量。
3、胰島素-轉(zhuǎn)鐵蛋白-硒添加劑(ITS):可降低多種細(xì)胞常規(guī)維持和低密度貼壁培養(yǎng)時所需的胎牛血清濃度。
4、地塞米松:一種抗炎糖皮質(zhì)素,對細(xì)胞存活、細(xì)胞信號傳導(dǎo)和基因表達(dá)具有一系列的影響。用于研究細(xì)胞凋亡、細(xì)胞信號傳導(dǎo)通路和基因表達(dá)。
5、氫化可的松:促進(jìn)表皮上皮細(xì)胞和乳腺上皮細(xì)胞增殖生長,提高神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞和成纖維細(xì)胞的克隆形成率。
6、白細(xì)胞介素2(IL-2):IL-2作為T細(xì)胞生長因子,可增強(qiáng)NK細(xì)胞的細(xì)胞溶解活性,并促進(jìn)B細(xì)胞產(chǎn)生免疫球蛋白。常用于NK92細(xì)胞的培養(yǎng)。
常見的問題
1、培養(yǎng)基使用效果不佳:應(yīng)定期確認(rèn)teknova培養(yǎng)基有效期,并確認(rèn)是否使用細(xì)胞相應(yīng)的培養(yǎng)基,培養(yǎng)基使用不當(dāng)會影響細(xì)胞狀態(tài)。例如,293T需用高糖DMEM培養(yǎng),而THP-1則需要用RPMI1640培養(yǎng)!
2、培養(yǎng)基使用時應(yīng)儲存于4ºC并分裝,避免反復(fù)升溫加速谷氨酰胺的降解。
3、不同培養(yǎng)基由于成分不同,顏色也不盡相同,例如DMEM呈鮮紅色,而MEM呈粉紅色。
4、細(xì)胞培養(yǎng)過程中,可根據(jù)細(xì)胞培養(yǎng)基顏色變化,對培養(yǎng)狀態(tài)進(jìn)行分析,當(dāng)teknova培養(yǎng)基變橙色甚至黃色時,說明細(xì)胞代謝產(chǎn)生了大量酸性物質(zhì),需及時更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
5、培養(yǎng)基開封,或者培養(yǎng)皿/瓶從培養(yǎng)箱中取出時,由于和空氣發(fā)生氣體交換,顏色會變?yōu)樽霞t色,放到CO?培養(yǎng)箱中即可恢復(fù)pH值,顏色變?yōu)檎5孽r紅色。